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2014年國劇盛典年度最佳男配角獎
2011年金鳳凰獎表演學會獎
2011年華鼎獎最佳男配角獎
2010年華鼎獎最佳男配角獎

1974年2月23日祖鋒出生于南京，中學就讀于南京市金陵中學。

1991年起在南京汽車制造廠工作四年。

1996年至2000年就讀于北京電影學院表演系，擔任團支書一職。

2000年至2006年留校任教，教授表演和臺詞，馬蘇、姚笛曾為他的學生。

2006年研讀北京電影學院首屆（06級）MFA表演專業研究生。

1997年參演個人首部話劇《四季愛情》，參演個人首部電視劇《潘漢年》。

1999年參演個人首部電影《魯鎮傳說》，飾惡氣痞氣的富家惡少丁家昌。

2001年主演電視電影《十面埋伏》，分飾兩角——明朝著名琵琶演奏家湯應曾和阿桂；主演電視劇《高原騎兵連》，飾騎兵軍官徐立平。

2003年參演電視劇《沉默的證人》，飾精神分裂病人石隱。

2005年參演電視劇《溫暖》和《沙家浜》。

2006年主演話劇《我愛愛情》，飾男主角小P；與劉涓共同執導數字電影《和順的夏天》和《掌聲響亮》。

2007年參演話劇《北京大爺》，飾歐日華；該劇演員全部為北京電影學院06級MFA表演專業在讀研究生。

2008年參演并執導電影《輪椅上的奇跡》，飾身患絕癥的擊劍教練許烽。參演電視劇《潛伏》，飾鋒芒畢露的軍統特務李涯；以精湛地演技成功塑造了一個執著堅定的反派人物，并榮獲2010年華鼎獎最佳男配角獎。特務李涯也已經成為了經典熒屏形象。同年8月參演電視劇《密戰》，飾國際商業間諜兼冷酷殺手蝴蝶。

2009年主演《寶貴的秘密》，飾山村青年照相師藍寶貴。同年7月參演電視劇《隱形將軍》，飾玩世不恭的富家公子哥兒韓奎，逐漸成長為優秀的共產黨地下工作者。同年9月參演鄭曉龍執導電視劇《金婚風雨情》，飾迂腐癡情的南方知識分子季誠。

2010年參演話劇《四世同堂》。同年2月參演電視劇《旗袍》，飾從投身革命的富家公子到投敵叛變的陰險叛徒趙世杰，他成功演繹前后反差極大的巨烈轉變，再次榮獲2011年華鼎獎最佳男配角獎。同年8月參演電影《建黨偉業》，飾學生領袖鄧中夏。同年10月主演孔笙執導的電影《天上的伙伴》，飾自閉癥女孩陸小荷的父親。

2011年2月參演孔笙執導電影《北川重生》。同年5月主演話劇《愛情的印象》祖鋒一人分飾8個不同角色。同年6月主演電視劇《時尚女編輯》，飾攝影師艾崇文。12月參演婁燁執導《浮城謎事》，飾警察童明松。

2012年5月主演電視劇《獨狼》，飾槍王之王林杰森。同年12月參演電視劇《婚戰》，飾編輯孟三力。

2013年1月參演許鞍華執導電影《黃金時代》，飾演東北作家羅烽。同年4月，第三度與孔笙導演合作，參演電視劇《北平無戰事》飾崔中石，完美演繹了一位外表溫潤優雅、不畏生死的中共地下黨，將2014年國劇盛典年度最佳男配角收入囊中。同年8月參演電視劇《謀圣鬼谷子》，飾姬元伯。同年9月參演張藝謀執導電影《歸來》，飾反派鄧指導。

2014年8月參演電視劇《刑警隊長》，飾刑警胡德強。同年9月至2015年2月，客串鄭曉龍執導電視劇《羋月傳》，飾屈原。同年11月至2015年2月參演電視劇《畢業歌》，飾中統特務頭子季家鳴。

2015年5月參演電視劇《雙刺》，出演獨具魅力的暖男特工彭剛。